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二氯甲烷哪家好?定性鑒別

發布時間:2021-12-08

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彪仕奇帶您了解色譜法在藥物研發中的一般應用,薄層色譜(TLC)法主要用于藥物的定性鑒別,可從斑點的位置(Rf值)與顏色兩方面對藥物進行定性,優于HPLC和GC法(只能從色譜峰保留時間把握藥物的定性性質),定量時僅用于有關物質的限度檢測(半定量),結合不同原理的檢視技術,TLC法能見到分析的“全圖”(whole picture),使各有關物質斑點均可顯示,但變異比HPLC法大;HPLC和GC法的主要優勢為定量,但如果運用得當,尤其在含量測定或有關物質項下已采用本法的情況下,利用對照品與供試品保留時間相同的特性作為鑒別依據,既不必專門實驗又增加了鑒別的專屬性,是非常可取的。由于分離分析的定量優勢,HPLC或GC法成為新藥研發不可缺少的手段,尤其生物樣品中藥物的定量,HPLC或GC法為最常用的分析手段。

定性鑒別

色譜法對同系物或具有相同母核藥物(尤其制劑)的鑒別具有光譜法和化學法無可比擬的優勢。但方法專屬性須經充分驗證,確保結構相近化合物或最難分離物質對在擬定色譜條件下能良好分離。申報資料所用鑒別法的色譜條件多數與有關物質、含量測定一致,實際上,在后兩者的方法學研究中,多以合成中間體、起始原料以及降解產物考察其專屬性,但在鑒別中,則以能夠與結構相似的同類藥物良好分離為主要考慮,故在專屬性驗證中宜得到體現。

但在實際操作中有時遇到同一物質在完全相同的色譜系統中保留時間不一致的情況,藥典中對保留時間(斑點位置)的一致性未予具體規定。對此,可采用如下措施:(1) 注意色譜系統的穩定性,流動相(展開劑)與固定相相匹配,在C18柱的反相色譜系統中,流動相有機溶劑比例不低于5%,避免C18鏈的隨機卷曲將造成色譜系統不穩定導致組份保留值波動的現象;TLC的色譜展開要適中,使主斑點的Rf值在0.2~0.7間。(2) 操作中另配制一供試品與對照品等量混合的溶液,進樣(點樣)后出現單一色譜峰(斑點)作為鑒別依據,以彌補該法之不足。

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