北京瓶裝異丙醇廠家直批彪仕奇:HPLC柱前衍生和柱后衍生的相關(guān)問(wèn)題?為什么要衍生?衍生化的分類(lèi)?進(jìn)行衍生,適用的化合物有哪些?進(jìn)行衍生化的要求有哪些?柱前衍生和柱后衍生的優(yōu)缺點(diǎn)?
色譜技術(shù)中的化學(xué)衍生法系指在色譜過(guò)程中用特殊的化學(xué)試劑(一般稱(chēng)為衍生化試劑或標(biāo)記試劑)使樣品成分轉(zhuǎn)變相應(yīng)的衍生物之后進(jìn)行分離檢測(cè)或進(jìn)行檢測(cè)的方法。目的為:1.將紫外—可見(jiàn)強(qiáng)吸收功能基團(tuán)引入被檢測(cè)對(duì)象或?qū)⑵滢D(zhuǎn)變?yōu)闊晒庋苌铮蕴岣邫z測(cè)靈敏度;2.提高對(duì)分析樣品的分離和選擇性。
從是否與HPLC系統(tǒng)聯(lián)機(jī)的角度,化學(xué)衍生法分為在線與離線兩種。從發(fā)生衍生化的場(chǎng)合,分為柱前衍生法與柱后衍生法兩種。目前,在HPLC中,以離線的柱前衍生法(簡(jiǎn)稱(chēng)柱前衍生法)與在線的柱后衍生法(簡(jiǎn)稱(chēng)柱后衍生法)使用居多。
普通的C18柱能作為正相色譜柱使用嗎?正相色譜體系中最常用也最普通的是那種色譜柱。正相柱在使用過(guò)程中與反向柱相比有什么需要注意的地方?
普通C18柱作為正相柱使用,我還沒(méi)聽(tīng)說(shuō)過(guò)。正相色譜分離模式是指固定相的極性比流動(dòng)相的極性大,反過(guò)來(lái),流動(dòng)相極性大就是反相。C18固定相屬于疏水性相對(duì)比較強(qiáng)的,疏水性強(qiáng)就是極性很弱,應(yīng)該找不出極性比它更弱的流動(dòng)相了。
正相體系常見(jiàn)的柱子有:硅膠柱、氨基柱、CN基柱和Diol二醇基柱,最普通的應(yīng)該就是硅膠柱。正相柱和反相柱比,最需要注意的是水分,正相柱對(duì)水分非常敏感,流動(dòng)相中水分含量的些微變化對(duì)保留時(shí)間影響很大,因此正相柱測(cè)定前平衡時(shí)間需要幾個(gè)小時(shí)甚至更長(zhǎng)。
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