濟南色譜級正庚烷彪仕奇:液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的,因此要求流動相具備以下的特點:
(1)流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。
(2)流動相與樣品不產生化學反應
(3)流動相的黏度要盡量小,以便得到好的分離效果;降低柱壓降,延長泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。
(4)流動相的物化性質要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器, 好使用對紫外吸收較低的溶劑配制。
(5)流動相沸點不要太低,否則容易產生氣泡,導致實驗無法進行。
(6)在流動相配制好后,一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測,還可以防止流動相中的微量氧與樣品發生作用。
液相色譜流動相的壞習慣
(1)向有機相中加入緩沖鹽
如果將水相的緩沖溶液加入到有機相中,會大大增加緩沖鹽析出的風險。緩沖鹽的析出在初期可能并不明顯,但會對儀器的各個部件都會產生一定影響。
(2)梯度洗脫時直接用泵去混合流動相并且流動相比例從0%開始
現在的液相色譜能夠非常高效的進行在線脫氣和流動相混合。但是將梯度洗脫比例從0%開始,會有比較大的出現氣泡和沉淀的風險。
(3)沒有使用正確的pH值修飾酸或堿作為緩沖液
緩沖溶液的修飾酸或堿,只使用生成緩沖鹽的酸或堿。例如,磷酸鈉緩沖液只能用磷酸或氫氧化鈉調節。
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