正庚烷哪家好?首選廠家彪仕奇。彪仕奇為大家收集總結了關于液相色譜的幾條問題,希望對大家有所幫助。
影響出峰時間的因素有哪些?
pH值不同出峰時間不同,具體原理是什么?除了pH值會影響,還有其他因素嗎?
答:流動相的pH值主要是影響到分配系數而出峰時間的不同。
影響出峰時間的因素有很多,從分配系數、容量因子等各個方面考慮,與目標化合物在固定相和流動相中的分配性質有關,還與流速,壓力,柱溫等液相色譜儀參數有關,具體涉及下面幾種因素的影響:
a.目標化合物本身,具體包括分子量、結構、化合物類型、極性等;
b.流動相,具體包括流動相構成、配比、流動相各組分極性,洗脫方式,流速等;
c.固定相,具體包括固定相種類,結構,色譜柱長度等;
d.分配系數與容量因子,具體包括化合物在流動相與固定相之間的分配情況,柱溫等。
有沒有方法將保留時間提前?
我現在用液相色譜做含量測定時,保留時間太長,20分鐘左右才出峰,有沒什么方法提前,原理是什么?
答:可以從通過改變目標組分容量因子k的方式,以及縮短柱長增加柱溫等方式,具體可以采取以下方法:
a.調整流動相,具體包括流動相構成、配比、流動相各組分極性,洗脫方式,提高流速等;
b.調整固定相,具體包括固定相種類,結構,縮短色譜柱長度等;
c.增加柱溫,降低流動相傳質阻力等。
流動相使用前為什么要脫氣?
答:首先我們了解一下不脫氣可能造成的影響:
氣泡會增加基線的噪音,造成靈敏度下降,甚至無法分析(噪聲增大,基線不穩(wěn),突然跳動)。
溶解的氧氣還會導致樣品中某些組份被氧化,柱中固定相(如烷基胺)發(fā)生反應,降解而改變柱的分離性能。
溶解氧能與某些溶劑(如甲醇、四氫呋喃)形成有紫外吸收的絡合物,此絡合物會提高背景吸收(特別是在260nm以下),并導致檢測靈敏度的輕微降低,會在梯度淋洗時造成基線漂移或形成鬼峰(假峰)。
若用FLD(熒光檢測器),溶解氧在一定條件下還會引起淬滅現象,特別是對芳香烴、脂肪醛、酮等。在某些情況下,熒光響應可降低達95%。
脫氣的作用:除去其中溶解的氣體(如O2),以防止在洗脫過程中當流動相由色譜柱流至檢測器時,因壓力降低而產生氣泡。
排出氣泡能減少泵工作的傷害,提高UV檢測器的性能高,改善靈敏度。
脫氣的方式:加熱回流法:效果較好,但操作復雜,且有毒性揮發(fā)污染,同時需要考慮低沸點溶劑揮發(fā)造成的組成變化。
抽真空脫氣法:易抽走有機相。
超聲脫氣法:流動相放在超聲波容器中(一般500ml溶液需超聲20~30min),此法不影響溶劑組成。超聲時應注意避免溶劑瓶與超聲槽底部或壁接觸,以免玻璃瓶破裂,容器內液面不要高出水面太多。
氦氣脫氣法:在色譜操作前和進行時,將惰性氣體噴入溶劑中。嚴格來說,此方法不能將溶劑脫氣,它只是用一種低溶解度的惰性氣體(通常是氦)將空氣替換出來。主要利用液體中氦氣的溶解度比空氣低,連續(xù)吹氦脫氣,效果較好,但成本高。
在線真空脫氣法:利用在線脫氣機在線脫氣,智能控制,無需額外操作,成本低,
脫氣效果明顯優(yōu)于以上幾種方法,并適用于多元溶劑體系。
怎樣提高高效液相色譜法的柱效?
答:1.要想提高液相色譜法的柱效,應當用小而均勻的固定相顆粒填充均勻,以減小渦流擴散和流動相傳質阻力,這是最佳的提升柱效的方法。
2.改進固定相的結構,可以減小滯留流動相傳質阻力以及固定相傳質阻力。
3.選用低粘度的流動相(如甲醇、乙腈等),也有利于減小傳質阻力,提高柱效。
4.合適的柱溫,也會影響到柱效。
5.降低流速、增加柱長也可以提高柱效。
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