北京色譜級(jí)環(huán)己烷彪仕奇為您總結(jié)了TLC上的位置與極性的關(guān)系,供大家參考。TLC上的位置,除了分子的極性外,也得考慮TLC的性質(zhì),是硅膠、氧化鋁或樹脂,因?yàn)椴煌腡LC與分子的作用是不同的,硅膠上有很多羥基,你的物質(zhì)是通過與硅膠形成氫鍵-洗脫-再形成氫鍵這樣在板上移動(dòng)的,這時(shí)極性大的物質(zhì)與硅膠作用強(qiáng),體現(xiàn)在TLC上就是位置靠下。但對(duì)某些樹脂,是通過疏水作用與你的分子作用的,極性大的樹脂對(duì)其吸附作用反而小,體現(xiàn)在TLC上是位置靠上。
另外,還得考慮一個(gè)展開劑的性質(zhì),如果是兩個(gè)物質(zhì)極性相差較小,不同的展開劑(極性及其它性質(zhì)),即使在同一種TLC上,展開后的位置也會(huì)有變化。我曾經(jīng)遇到過這樣的例子,兩個(gè)分子用硅膠板在不同的展開條件下,展開后其前后位置竟顛倒了。如果分子的極性相差很大,比如一個(gè)是鹽,一個(gè)是中性分子,那只要在同一種TLC上,比如硅膠,展開后總是鹽在后(一般在原點(diǎn)不動(dòng)),中性分子在前。但如果極性相差不大,那各種影響因素都得考慮。
展開劑的極性,在硅膠板上,極性大的展開劑會(huì)把同一種物質(zhì)推得更靠前。甲醇的極性比乙腈大,但前面已說過,展開過程非常復(fù)雜,這并不是唯一的考慮。
通常情況是這樣,但也有例外,如說到:‘比如一個(gè)是鹽,一個(gè)是中性分子,那只要在同一種TLC上,比如硅膠,展開后總是鹽在后(一般在原點(diǎn)不動(dòng))’,我做過個(gè)雜環(huán)芳胺,其鹽酸鹽和游離胺在同一種TLC上的Rf值是一樣的,可能是特例,基本同意。
TLC時(shí)大家總喜歡談極性的問題,我從不考慮誰的極性大誰的極性小,我只看誰跑在上面誰跑在下面!過柱子時(shí)Rf值大的先出來,Rf值小的后出來!管它極性大小!
一般是對(duì)同一個(gè)樣品,展開劑的極性越大,被展開的物質(zhì)爬的越快。
硅膠板一般屬于正相系統(tǒng),固定相極性大,展開劑極性小,所以被分離物質(zhì)在傳統(tǒng)的硅膠TLC中,跑的快的是極性較小的,跑的慢的是極性較大的
不管是TLC還是HPLC,物質(zhì)跑的快慢都與物質(zhì)本身及流動(dòng)相的極性相關(guān),物質(zhì)的極性與流動(dòng)相的極性越接近,越跑的快。
兩者極性相近結(jié)構(gòu)形似,選展開劑時(shí)這兩個(gè)物質(zhì)總是離得很近,則要減少極性,爬到頭后,吹干,繼續(xù)爬板。重復(fù)幾次就能分開.
大家談?wù)勂綍r(shí)TCL時(shí)的經(jīng)驗(yàn),雖說爬板分離是很普通的一件事,卻有很多注意的地方:
點(diǎn)樣時(shí)濃度要調(diào)節(jié)適當(dāng),點(diǎn)樣時(shí)樣品點(diǎn)不要過大,展開劑的液面不要沒過點(diǎn)的樣;
點(diǎn)樣大小,濃度要把握好,有是需要的話,可以點(diǎn)2個(gè)點(diǎn);
點(diǎn)樣的高度,一般選擇1cm左右;
點(diǎn)板時(shí)要選擇合適的展開劑,RF選擇在0.4-0.5左右(個(gè)人意見),如果是兩個(gè)點(diǎn)或多個(gè)點(diǎn)時(shí),RF2-RF1>0.1左右;
展開劑最好是現(xiàn)配,不要擱置太久。
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