液相色譜峰的保留時間不重現分為兩種情況:一是保留時間單方向的漂移,即保留時間提前或延后;二是保留時間無規律的波動,即保留時間忽前忽后。下面色譜級乙腈彪仕奇來說說主要的影響因素及如何改善。
色譜柱平衡不夠
若發生保留時間漂移,需要考慮流動相是否已使色譜柱達到充分的平衡。一般情況下,流動相平衡色譜柱需要10-20個柱體積;但如果流動相中有使用弱酸、弱堿、緩沖鹽和離子對試劑,或者固定相為正相硅膠等,則需要更長的時間來平衡色譜柱。
色譜柱污染或受損
這時也可能會導致保留時間的漂移,需要同時觀察色譜峰型、柱效、壓力的變化情況,推測色譜柱是否被污染。可以根據具體的測試條件來選擇適當的溶劑進行色譜柱的沖洗,或更換新的色譜柱。為了延長色譜柱的使用壽命,增加保護柱是非常有效的方法。
柱溫改變
確認柱溫的準確性,柱溫的變化也會導致保留時間的變化。
流動相改變
流動相中某種試劑的揮發,流動相中不同試劑的比例配制有誤,也會導致保留時間的變化,需要確認流動相是否新鮮與正確。
流速改變
觀察柱前壓力,如果壓力不穩定或者偏離正常值,可能是泵流速不準確或者有氣泡產生,出現保留時間的不穩定,需要保證儀器流速的準確性與穩定性。
系統存在泄露或堵塞
觀察系統壓力,如果幾次進樣的壓力曲線不能重合或差別比較大,可能是系統存在泄露或堵塞,出現保留時間的不穩定,需要依次排查系統中有無漏液或堵塞異常。
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